Садржај

• На корак
• 1. део од 2: Провера калибрације
• 2. део од 2: Израчунавање резултата

Пипета је врста лабораторијске опреме која се користи за мерење и пренос врло малих количина течности. Тачност и прецизност мерења пипете су неопходни, јер свако одступање у испорученим количинама може утицати на резултате експеримента. Да бисте осигурали тачност, потребно је сваких неколико месеци проверавати калибрацију пипете. Процес калибрације помаже у верификовању да опрема точи исправне количине, тако да се може обновити ако није.

На корак

1. део од 2: Провера калибрације

1. Прикупите потребне материјале. Да бисте проверили калибрацију пипете, потребна су вам пипета, врхови пипета, дестилована вода, чаша, термометар, вага и посуђе. Вага мора бити микрограм специфичан за калибрацију микропипета са максимално 1 µл.
   • Не треба вам више од 5 мл воде. Напуните шољу водом.
   • Уверите се да се врхови пипете правилно уклапају.
2. Измерите температуру дестиловане воде. Ставите термометар у воду и оставите да одстоји најмање један минут. Ако се црвена линија на термометру и даље помера, оставите је још минут. После минута запишите температуру у свеску. Уклоните термометар и осушите га када завршите.
   • Температура воде је важна за прорачуне направљене за проверу калибрације.
3. Ставите вагу на вагу и поставите је на нулу. Идеално је да користите вагу са вратима и изоловану собу. Ставите посуду у собу и затворите врата. Ако нема врата, само ставите посуду на вагу. Притисните дугме „Нула“ или „Тара“ и сачекајте да вага очита нулу.
   • Постављањем ваге на нулу, тежина пластичне посуде се не узима у обзир и постаје могуће измерити само тежину онога што сте ставили у посуду.
4. Припремите пипету за калибрацију. Пре почетка обришите пипету етанолом како бисте убили све нечистоће - поред тога, уверите се да се врх пипете не зачепи. Поставите тачан врх на крај и подесите јачину звука коју желите да тестирате.
   • Пре калибрације тестирате и најмању и највећу запремину коју пипета може да дозира.
5. Исперите врх пре калибрације. Притисните дугме до првог заустављања и уметните врх у дестиловану воду тако да је око 2 мм уроњено у течност. Отпустите дугме да бисте испрали мало течности, а затим поново налијте течност притискајући дугме надоле. Поновите ово три пута да бисте испрали врх.
   • Притисните дугме до другог граничника да бисте напунили остатке течности у врху и уклонили пипету из воде.
6. Нацртајте калибрациону запремину. Са врхом избаченим из течности, притисните дугме до првог заустављања. Ставите око 2 мм од врха у дестиловану воду и отпустите дугме да повучете течност у врх. Сачекајте око секунде пре него што извадите врх из воде.
   • Уверите се да је врх у потпуности потопљен током читавог процеса аспирације. Не желите мехуриће на врху или резултат неће бити тачан.
7. Дозирајте течност у посуду на ваги. Ставите врх на дно посуде и притисните дугме доле до првог заустављања. Померите се на друго место, мало даље од воде, и притисните дугме до другог заустављања. Држите притиснуто дугме и подигните врх посуде.
   • Држите врх на пипети, јер ћете га поново користити за обављање додатних тестова калибрације. Уверите се да врх не додирује ништа.
8. Снимите тежину која указује на равнотежу. Затворите врата ако користите вагу у изолованој соби. Сачекајте да се вредности престану мењати. Забележите ову вредност у своју бележницу.
   • Важно је сачекати да се број стабилизује пре него што га запишете. Очитавања ће бити погрешна ако не сачекате.
9. Понављајте овај поступак док не направите најмање 10 мерења. Подесите равнотежу на нулу, исперите врх, извуците исту запремину, разделите запремину и забележите тежину. Потребно вам је више снимака исте запремине и тада можете узети просек свих снимака заједно.
   • Можете поновити исти поступак са различитим запреминама, под условом да направите више мерења по запремини.

2. део од 2: Израчунавање резултата

1. Користите формулу за израчунату запремину. Формула за израчунавање запремине коју пипета испоручује је В = в * З, где је в тежина воде, З је фактор конверзије заснован на густини воде, а В је израчуната запремина количине воде тамо се предаје.
   • З варијаблу можете пронаћи тако што ћете потражити густину воде користећи температуру забележену на почетку експеримента.
   • На пример: Ако је температура воде била 23 ° Ц, претпостављате З вредност од 1,0035 µг / мг.
2. Израчунати средњу вредност поновљених испитивања. Сигурно сте барем 10 пута измерили количину воде коју сте испустили пипетом. Да бисте израчунали средњу вредност свих ових вредности, збројите их и поделите са 10. Ако сте направили мање или више покуса, додајте сваки покус и зброј поделите са укупним бројем покуса.
   • На пример: Десет тегова које сте регистровали за запремину пипете од 10 µл су следећи: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 и 9,98.
   • Средња вредност је: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Примените променљиве на једначину и решите је. Једном када одредите тачне вредности за сваку променљиву, можете их уградити у једначину и решити израчунату запремину. Да бисте то решили, једноставно помножите просечну тежину свих вредности теста са вредношћу З.
   • На пример: В = в * З = 9.984 * 1.0035 = 10.019
4. Израчунајте тачност пипете. За израчунавање тачности можете користити једначину А = 100 к В._прос/ В₀ где је А прецизност пипете, В._прос средња израчуната запремина и В.₀ вредност коју сте поставили за пипету. Тачност мора бити између 99-101%.
   • Ако је пипета правилно калибрисана, израчуната вредност треба да буде врло близу стварној вредности коју сте поставили на пипети.
   • На пример: А = 100 к В_прос/ В₀ = 100 к 10,019 / 10 = 100 к 1,0019 = 100,19%
   • Ова пипета је правилно калибрирана.
5. Пошаљите пипету на калибрацију, ако је потребно. Ако ваша пипета не падне на тесту калибрације, одмах престаните да је користите за експерименте. Пипете су врло осетљиви и скупи делови лабораторијске опреме. Калибрацију не можете сами поправити, па ћете је морати послати на правилно одржавање. Неке компаније ће доћи у вашу лабораторију и тамо калибрисати ваше пипете.
   • За одржавање обратите се компанији која производи вашу марку пипете.